猪细小病毒病是由猪细小病毒(PorcineParvovirus.PPV)感染引起以母猪繁殖障碍为主要特征的病毒性传染病，其特征是母猪怀孕前期感染该病毒后，经胎盘使胚胎或胎儿受到侵袭，引起母猪流产、死胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等，同时还可引起仔猪的皮炎和腹泻。1967年Cartwright等首次分离出PPV后，该病在世界范围内广泛传播和流行。1982年，中国兽药监察所在国内率先分离到PPV，潘雪珠等学者分别在黑龙江、上海、四川、广东、河北、天津等省(市)分离到PPV。目前，在我国绝大多数猪场均有PPV的感染。近年来该病与猪回环病毒病、猪蓝耳病、猪伪狂犬病等繁殖障碍病混合感染较为严重，给养猪业带来较大损失。因此，加强猪细小病毒病的防治具有重要的意义。
1 病毒学特性
PPV属于细小病毒科细小病毒属，该属病毒包括阿留申病毒(ADV)牛细小病毒(BPV)、猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、貂肠炎病毒(MEV)、犬细小病毒(CPV)、兔细小病毒(LPV)、猪细小病毒(PPV)、鹅细小病(CPV)及番鸭细小病直(MPV)等。到目前为止，仅发现少数病毒可导致有明显临床症状的传染病，而大多数呈潜伏或持续感染状态。成熟的PPV粒子外观呈六角形或圆形，无囊膜，直径为20～23nm，二十面体轴立体对称，有2～3个衣壳蛋白(分子质量约为60 ku)，32个壳粒(分子质量约为1.4×106u)。病毒基因为单股DNA，约含有5000个碱基对，G+C含量为48%，DNA约占整个病毒粒子分子质量的26.5%，浮密度为
2 流行病学
2.1 国际流行情况
自Cartwright和Huck于1967年首次从英国猪流产胎儿脏器中分离出PPV以来，已在比利时(1967)、德国(1968)、日本(1972)、美国(1972)、荷兰(1972)、澳大利亚(1973)、南非(1975)、芬兰(1979)、法国(1977)及加拿大(1978)、巴拿马(1987)等国相继报道。由于本病的广泛流行和危害，已被世界各国普遍重视。各国猪群血清学调查阳性检出率都比较高，如澳大利亚、法国、芬兰、南非、南朝鲜、美国、阿根廷等国其阳胜率最低为40.7%，最高为99.6%，多在80%～90%之间。而在日本估计有10%、克岁埃西亚41.6%、芬兰81.1%、西班牙
2.2 国内流行情况
PPV在我国发现较晚，但流行却相当普遍。1982年潘雪珠等首次从上海郊区某猪场繁殖母猪的流产、死胎、木乃伊胎儿的脏器组织中分离到PPV，从而证实了本病在我国的存在。随后，吉林侯世宽、四川邬捷、湖北李刚明、福建程道祥、浙江邱建明等先后分离到PPV毒株。上世纪九十年代以来，我国养猪业迅速发展，集约化猪场大量涌现，猪细小病毒病电在全国范围内流行，遍及二十多个省市。1990～1994年卢洪芬等调查了广东省26个市63个大中型猪场，发现猪场血清阳性率为100%，猪群血清阳性率为81.6%，其他相关检测数据都说明，我国PPV感染十分严重，集约化养猪场尤为显著，给养猪业造成了重大的经济损失。
3 临床症状及病理变化
PPV可以感染不同品种不同日龄阶段的猪，包括：家猪、野猪、仔猪、后备猪、育肥猪以及SPF猪，但除怀孕母猪外，其他类型的猪感染后均无明显临床症状。性成熟的母猪或不同怀孕期的母猪感染PPV后，临床上主要表现为繁殖障碍，如发情不正常，久配不孕，或产死胎、畸形胎、木乃伊胎或产带毒弱仔。PPV感染对公猪的性欲和受精率没有明显影响。通常在母猪怀孕10～30d感染时，会出现胚胎死亡并被吸收；在怀孕30～50d感染时，主要引起产木乃伊化胎儿；怀孕50～60d感染时，多出现死胎；怀孕70d感染的母猪常出现流产症状；而怀孕70d后感染的母猪则多能正常产活仔猪。此外，PPV感染还可导致猪的皮炎和腹泻。
怀孕母猪感染PPV后可见轻度的子宫内膜炎，胎盘钙化，子宫体积稍大，内含许多黑褐色肿块，为木乃伊化的死胎。母猪妊娠黄体萎缩，子宫上皮组织和固有层有局灶性或弥漫性单核细胞浸润。感染的胎儿可见水肿、体腔积液、充血、出血及坏死等病变；感染胚胎的肺、肝、肾等实质性器官及小脑神经细胞核血管内皮出现血管炎及脑膜炎、间质性肝炎、肾炎。脊髓和眼脉络膜血管周围有浆细胞、淋巴细胞形成的“袖套”。PPV感染死胎可见多种组织和器官广泛性细胞坏死、炎症和核内包涵体，在大脑灰质、白质和软脑膜偶有以增生外膜细胞、组织细胞核浆细胞形成血管套为特征的脑膜脑炎变化，是本病特征性病变。PPV感染还能引起皮炎、肠炎以及PMWS(Porcine postweaning mulsystemic wasting svn drome PMWS仔猪多系统衰竭综合症)等病变。
4 诊断方法研究进展
引起猪繁殖障碍的病原有很多，而且症状大多比较相似。因此仅根据流行病学、临床症状和病理变化，很难对该病进行确诊，如果是多种病原混合感染，则诊断更为困难。
4.1 病原学诊断
4.l.l 病毒分离鉴定 病毒分离鉴定是PPV最为可靠的诊断方法。通常采取可疑流产和死产胎儿脑、肾、肺、肝、脑、睾丸、肠系膜淋巴结以及母猪胎盘等作为分离病毒的病料。其中，以肠系膜淋巴结和肝脏的PPV分离率最高；对亚临床感染的猪，最好采集鼻腔分泌物。病料处理后接种尚未长成单层的猪肾原代细胞或睾丸细胞，也可与培养细胞同步接种，PKl5细胞不如ST细胞敏感。待出现70%细胞病变(如果无细胞病变或细胞病变不明显，盲传3代，同时设立空白对照)，收获细胞培养液进行进一步鉴定。该方法可靠、确实，但操作繁琐、费时，且需要相应的设备条件。
4.l.3 酶联免疫吸附试验(ELISA)姜永厚等建立了从猪胎儿脏器中检测猪细小病毒抗原的双抗夹心ELISA。首先利用兔抗PPV抗体包被酶标板，然后加入被检血清，再加入兔抗PPV酶标抗体。对随机选择的5份样品同时进行病毒分离培养、HA试验和ELISA试验，发现结果完全相符。
4.l.6 核酸探针技术 该技术首先由Krell等应用于PPV的诊断，将以PPV RF DNA酶切得来的3.0kb的DNA片段用放射性同位素标记后作为探针，通过斑点杂交检测培养细胞中的PPV，最低可检出0.1pg DNA。侯喜林等分别用PPV DNA的HindⅢ/PSt片段及含该片段的pUSl9重组质粒进行地高辛标记制备探针，对PPV DNA进行斑点杂交，结果表明两种探针均为阳性，并且后一种探针的敏感性高于前者。说明该方法与HA、SN相比，具有较高的特异性和敏感性。
4.2 血清学检测
5 疫苗研究进展
在防控方面，对于从未发生过PPV感染的农场和地区，应该杜绝引进病猪和带毒猪，对公猪精液进行检查，PPV阴性猪方可引进。由于PPV的血清型单一且免疫原性高，疫苗免疫是预防PPV感染、提高母猪繁殖率的有效方法。
5.1 灭活疫苗
目前，主要使用灭活疫苗用于猪细小病毒病的免疫预防。1976年，Suzuki和Fujisaki首先研制了用于防治猪细小病毒病的灭活疫苗。随后，Joo和Johnson、Mengeling、Fujisaki等分别研制了PPV灭活疫苗。在我国潘雪珠、韩孝成、肖驰、邬捷、吕建强等也先后研制出PPV灭活疫苗。Mengeling等用N-乙酰乙烯亚胺(AEI)在
5.2 弱毒疫苗
PPV弱毒疫苗免疫原性好，免疫后产生抗体快，维持时间长，但人们对弱毒疫苗的重组以及毒力返强的担心，一直制约着弱毒疫苗的应用。目前，PPV弱毒疫苗主要有NADL- 2(细胞培养适应株)、HT株(低温细胞传代育成株)、HT-SKC(HT株经紫外线照射后再传代育成株)和N株(自然弱毒株)。最早发现和应用于临床的是NADL-2弱毒株，该毒株是将PPV强毒株连续传代50次致弱的毒株。经临床试用证实，母猪在繁殖前接种弱毒疫苗可产生免疫反应，并可抵抗强毒的攻击。HT株是由日本Fujisaki等将有毒力的PPV在猪肾细胞上
5.3 基因工程苗
Martinez等将PPV VP2基因克隆到杆状病毒表达系统中，并成功地在昆虫细胞中高效表达，表达的VP2多肽能自我装配成病毒样粒子(Virus-like panticales)用其免疫母猪能诱导产生免疫应答。在PPV的基因工程疫苗的研究方面，可将VP基因重组到伪狂犬病毒载体中，获得伪狂犬病和猪细小病毒病的二联重组基因工程疫苗。赵俊龙等利用PPV VPl和VP2基因分别构建的核酸疫苗，均能产生较高水平的体液免疫和细胞免疫，比常规灭活疫苗产生的抗体滴度稍高。
6 展望
PPV早期的研究主要集中在病原学、理化性质、防治等方面，后来人们逐渐加强了PPV分子结构和基因组成等方面的研究，迄今为止，人们已基本搞清楚了PPV基因组的一级结构，转录图谱和翻译图谱，为猪细小病毒的分子生物学以及分子流行病学研究奠定基础。近来，人们发现猪细小病毒经常存在于其他疫病的混合感染当中，如断奶仔猪多系统衰竭综合征，从而引起人们的极大关注。有关猪细小病毒基因工程疫苗的研究应用还不是十分广泛，PMWS和PRDC等疾病中所起的作用也没有深入研究，但随着基因技术和现代科学的进步，人们必将大力投入到这些领域的研究。
作者单位： (广东省东莞市动物疫病预防控制中心，东莞 523086)
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